96穴ディスポ平衡化ダイアライザー™(96-Well DispoEquilibrium DIALYZER™)

ADME[ADME: Adsorption, Distribution, Metabolism, Excretion(吸収、分布、代謝、排泄)] における薬物動力学特性(Pharmacokinetic Properties)のスクリーニングで、ヒト血漿タンパク質などを試料として平衡化透析を行う際、この特許取得済「96穴ディスポ平衡化ダイアライザー」は、画期的なハイスループット・スクリーニング商品として、最大96検体が同時に処理できます。すでにコルチゾール、T4甲状腺ホルモン、テストステロンなどホルモンのバインディング・アッセイでも実績があります。平衡化透析はその平衡化における各種パラメーターの影響を最小限にする生理的条件下で、分子間相互作用を直接アッセイできるので、分子間の結合状態を知るのに最適な手法です。

この96穴ディスポ平衡化ダイアライザーは、質量分析装置(Mass Spectrometry)による新薬候補の解析前処理においても、そのターゲットとなる化合物を増幅させることができますので、有効な方法として利用できます。

このプレートのウェルは、独立したメンブレンを各々に持っていますので、サンプルのクロス・コンタミネーションの危険性を排除しました。そして個々のウェル間での再現性は優れており、高いサンプル回収率が得られます。ウェルは最大300μLまでの、サンプル及びバッファー容量を許容します。ウェルを密閉する上下の蓋は、８連キャップのストリップ状になっており、実験によって８連を数列だけ使用したり、96穴全部を使用したり自由にできます。96穴ディスポ平衡化ダイアライザーは、高品質の再生セルロースで分子量カットが、10,000ダルトンのメンブレンを用意しております。96穴プレートはSBS(Society of Biomolecular Screening)規格で、ウェル間のスペースが十分に空いており、自動化システム対応となっています。

　

　

アプリケーション

  • ADMEにおける薬物動力学特性のスクリーニング
  • タンパク質 バインディング・アッセイ
  • タンパク質／ドラッグ バインディング・アッセイ
  • レセプター バインディング・アッセイ
  • リガンド バインディング・アッセイ
  • タンパク質／タンパク質 インターラクション
  • タンパク質／DNA インターラクション

特徴

  • 96穴フォーマット
  • 個々の独立したメンブレンが、 各々のウェルに装着
  • サンプル量：50〜300l
  • 透析用超薄膜の再生セルロース・メンブレン
  • 硫化物やグリセリンを、 一切含有しないメンブレン
  • 個々のウェル間での優れた再現性
  • 高いサンプル回収率( >95%)
  • SBS（Society of Biomolecular Screening）規格対応プレート・サイズ

専用プレート・ロテーター

96穴ディスポ平衡化ダイアライザー専用のプレート・ロテーターは、二速の振動速度を持っています。このプレート・ロテーターを使用することによって、サンプルが常時振動されており、平衡化の時間短縮と、優れた再現性が得られます。

96穴ディスポ平衡化ダイアライザーがセットされた
専用のプレート・ロテーター

　

96穴ディスポ平衡化ダイアライザー [10,000ダルトン分子量カット(青色)]


平衡化透析のメカニズム

　

もし低分子化合物とタンパク質が結合しなければ、低分子化合物は自由にメンブレンを通過して行き来します。そして、平衡化透析完了後、アッセイ・チェンバーの低分子化合物濃度は、最初サンプル・チェンバーに注入した低分子化合物濃度の半分になります。

　

もし低分子化合物とタンパク質が、結合してコンプレックスを形成してしまった場合、結合した低分子化合物はメンブレンを通過することができないので、サンプル・チェンバーに残留します。そして結合しなかった低分子化合物は、平衡透析完了後にはサンプル・チェンバーとアッセイ・チェンバーに半々に存在しますので、最初サンプル・チェンバーに注入した低分子化合物から、結合した低分子化合物を差し引いた低分子化合物濃度の半分になります。

　

 

96穴ディスポ平衡化ダイアライザーの米国食品医薬品局(FDA)登録

 

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弊社では平衡化透析の技術資料として、小冊子「Guide to Equilibrium Dialysis」(28ページ)と、下記の参考文献を用意しておりますので、ご希望の方は弊社までお問い合わせ下さい。
  参考文献一覧表
1. Development of a High Throughput Equilibrium Dialysis Method, Ilona Kariv, Hong Cao, and Kevin R. Oldenburg, Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 90, No.5, May (2001) 580-587
2. Determination of Plasma Protein Binding in Support of Early ADME Drug Discovery Efforts by LC/MS/MS, John P.Walsh, Reginald O. Angeles, Kelly M. Jenkins, and Robyn A. Rourick, Pittsburg Conference March 2002
3. Determination of fraction unbound docetaxel using microequilibrium dialysis, Milin R. Acharya, Sharyn D. Baker, Jaap Verweij, William D. Figg, and Alex Sparreboom, Analytical Biochemistry 331 (2004) 192-194
4. Binding of gefitinib (ZD1839) to human plasma proteins: in vitro and clinical pharmacokinetic (PK) studies, Jing Li, Julie Brahmer, Wells Messersmith, Manuel Hidalgo, and Sharyn D. Baker, EORTC-NCI-AACR Meeting, Geneva (Oct. 2004)
5. 創薬における探索薬物動態スクリーニング (I) ━ 幅広い物性を有する化合物のための吸収評価系の確立 ━ 小村 弘、河原亥一郎、茂本友貴枝、松田健一、河野理恵子、村山洋子、森脇俊哉、吉田長弘 薬学雑誌 125 (1) 121-130 (2005)
6. 創薬における探索薬物動態スクリーニング (II) ━ 代謝スクリーニングにおける in vitroと in vivo の相関性の検討 ━ 小村 弘、松田健一、茂本友貴枝、河原亥一郎、河野理恵子、村山洋子、森脇俊哉、吉田長弘 薬学雑誌 125 (1) 131-139 (2005)
7. Relationship of systemic exposure to unbound docetaxel and neutropenia, Sharyn D. Baker, Jing Li, Albert J. ten Tije, William D. Figg, Wilfried Graveland, Jaap Verweij, and Alex Sparreboom, Clinical Pharmacology & Therapeutics (January 2005); 77(1) 43-53
8. Kringle 5 of Human Plasminogen Induces Apoptosis of Endothelial and Tumor Cells through Surface-Expressed Glucose-Regulated Protein 78, Don J. Davidson, Catherine Haskell, Sandy Majest, Abdullah Kherzai, David A. Egan, Karl A. Walter, Andrew Schneider, Earl F. Gubbins, Larry Solomon, Zhebo Chen, Rick Lesniewski, and Jack Henkin, Cancer Research 2005; 65 (11). June 1, 2005
9. Automatable Formats of Higher Throughput ADMET Profiling for Drug Discovery Support, Paul V. Kaplita, Hanbo Hu, Lisa Liu, Thomas M. Farrell, Heather Grbic, and Denice M. Spero, JALA (Journal of Laboratory Automation) June 2005; 10: 140-148
10. Direct determination of unbound intrinsic drug clearance in the microsomal stability assay, Claudio Giuliano, Mark Jairaj, Christian M. Zafiu, and Ralph Laufer, Drug Metabolism and Disposition Vol. 33, No. 9 (2005) 1319-1324
11. Interspecies differences in plasma protein binding of MS-275, a novel histone deacetylase inhibitor, Milin R. Acharya, Alex Sparreboom, Edward A. Sausville, Barbara A. Conley, James H. Doroshow, Jurgen Venitz, and William D. Figg, Cancer Chemotherapy and Pharmacology (2006) 57: 275-281
12. Free Thyroid Hormones in Serum by Direct Equilibrium Dialysis and Online Solid-Phase Extraction ?Liquid Chromatography /Tandem Mass Spectrometry, Bingfang Yue, Alan L. Rockwood, Tanya Sandrock, Sonia L. La’ulu, Mark M. Kushnir, and A. Wayne Meikle, Clinical Chemistry 54:4 (2008) 642-651
13. Species difference in intestinal absorption mechanism of etoposide and digoxin between cynomolgus monkey and rat, Nishimura T, Kato Y, Amano N, Ono M, Kubo Y, Kimura Y, Fujita H, and Tsuji A, Pharmaceutical Research, 25(11): 2467-2476 (2008)
14. Effect of P-glycoprotein-mediated efflux on cerebrospinal fluid concentrations in rhesus monkeys, Cuyue Tang, Yuhsin Kuo, Nicole T. Pudvah, Joan D. Ellis, Maria S. Michener, Melissa Egbertson, Smuel L. Graham, Jacquelynn J. Cook, Jerome H. Hochman, Thomayant Prueksaritanont, Biochemical Pharmacology 78 (2009) 642-647
15. Validation and implementation of a liquid chromatography/tandem mass spectrometry assay for quantitation of the total and unbound RO4929097, a γ-secretase inhibitor targeting Notch signaling, in human plasma, Jianmei Wu, Richard Wiegand, Patricia LoRusso, and Jing Li, Journal of Chromatography B, 879(2011) 1537-1543
16. Determination of unbound ticagrelor and its active metabolite (AR-C124910XX) in human plasma by equilibrium dialysis and LC-MS/MS, Henrik Sillen, Melanie Cook, and Patty Davis, Journal of Chromatography B, 879 (2011) 2315-2322

カタログ番号 商　　品
74-2331

96穴ディスポ平衡化ダイアライザー・プレート(10,000ダルトン分子量カット)
74-2302

96穴ディスポ平衡化ダイアライザー
専用プレート・ロテーター
74-2334

96穴ディスポ平衡化ダイアライザー
ダブル専用プレート・ロテーター

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