ここでは、Recombinant κ-Bungarotoxin を、まず逆相（RPC）HPLC カラムで疎水性の違いによって部分精製し、次に弱陽イオン交換体(PolyCAT A)HPLC カラムで、微小なイオン的チャージの違いで、目的物質を分離精製しました(出典文献1.)。

もう一つの例としては、強陽イオン交換体(SCX)/逆相(RPC)HPLCのタンデムで、目的物質を分離精製しています(出典文献2.)。

2-D(RPC/WCX)Purification of Recombinant κ-Bungarotoxin

	1. Column: Vydac 218TP1022 (C18, 300A,10μm, 22x250mm)   Eluent A: 0.1% TFA in H2O   Eluent B: 0.1% TFA in ACN   Flow rate: 10ml/min   Gradient: 0.5% B/min
	2. Column: Column: PolyCAT A 204CT0503 (Weak Cation Exchange, 300A, 5μm, 4.6x200mm)   Eluent A: 25mM Na-PO4, pH6.0 with 10% ACN   Eluent B: 500mM Na-PO4, pH7.0 with 10% ACN   Flow rate: 1.0ml/min   Gradient: 1% B/min

出典文献1.: Purification of an Active Species of Recombinant κ-Bungarotoxin, James J. Fiordalisi, Regina L. Gigowski, and Gregory A. Grant, Protein Expression and Purification 3, 282-289(1992)

出典文献2.: Direct Analysis of Protein Complexes Using Mass Spectrometry, Andrew J. Link, Jimmy Eng, David M. Schieltz, Edwin Carmack, Gregory J. Mize, David R. Morris, Barbara M. Garvik, and John R.Yates,III,Nature Biotechnology Vol.17, July (1999) 676-682