ここでは、γ -Interferonのトリプシン消化物として作られた糖鎖含有のペプチド・フラグメントを、まず逆相（RPC）HPLCカラムで疎水性の違いによって部分精製し、次に親水クロマトグラフィ（HILIC）HPLCカラムで、アミノ酸配列は同じでも、含有されている糖鎖が違うだけのシアル酸バリアントのペプチド・フラグメントをその微小な極性残基の違いによって分離精製しました。

もう一つの例としては、強陽イオン交換体(SCX)/逆相(RPC)HPLCのタンデムで、目的物質を分離精製しています(出典文献2.)。

2-D(RPC/HILIC)purification of Glycopeptide from a Tryptic Digest of γ -Interferon

1. Column: Vydac 218TP51 (C18, 300A, 5mm, 1.0x250mm)   Eluent A: 0.1% TFA in 95/5 H2O/ACN   Eluent B: 0.085% TFA in 5/95 H2O/ACN   Flow rate: 50μl/min   Gradient: 0-100% B in 30min 2-A.& B. Column: PolyHYDROXYETHYL A 151HY0503 (Hydrophilic Interaction Chromatography, 300A, 5mm, 1.0x150mm)   Eluent A: 10mM triethylamine in 15/85 H2O/ACN, pH6.0   Eluent B: 10mM triethylamine + 25mM sodium perchlorate in 80/20 H2O/ACN, pH6.0   Flow rate: 50ml/min   Gradient: 0-100% B in 60min

出典文献.:Quantitative Analysis and Process Monitoring of Site-specific Glycosylation Microheterogeneity in Recombinant Human Interferon-g from Chinese Hamster Ovary Cell Culture by Hydrophilic Interaction Chromatgraphy,Jifeng Zhang and Daniel I. C. Wang, Journal of Chromatography B, 712(1998)73-82